NK培養基是一種用于體外培養自然殺傷細胞(Natural Killer cells,NK細胞)的專用培養基。NK細胞是免疫系統中的重要淋巴細胞類型,主要功能是識別并清除病毒感染的細胞和腫瘤細胞。NK培養基的設計旨在為NK細胞提供適宜的營養、激活和增殖條件。以下是詳細介紹:
1.組成特點
NK培養基通常基于基礎的培養基(如RPMI 1640或IMDM),并經過優化以支持NK細胞的生長和功能活性。常見成分包括:
1.基礎培養基:提供細胞生長所需的氨基酸、維生素、無機鹽等。
2.血清:
常用胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)或人血清。
提供生長因子和營養物質,支持NK細胞生存。
3.細胞因子(Cytokines):
IL2(白介素2):常用的激活和促進NK細胞增殖的因子。
有時還會添加IL15、IL12、IL21等,用于增強NK細胞的增殖和細胞毒活性。
4.抗生素/防腐劑:
如青霉素鏈霉素,以防止細菌污染。
5.其他添加物:
L谷氨酰胺:維持細胞代謝。
β巰基乙醇:在某些方案中可改善NK細胞活性。
>注意:不同實驗室或供應商的NK培養基配方可能略有差異,部分為商業化配制好的“完全培養基”。
2.培養條件
1.溫度:37°C
2.二氧化碳濃度:5%CO?
3.濕度:>90%
4.培養方式:
懸浮培養:NK細胞通常為懸浮生長,不依賴貼壁。
培養瓶或低黏附培養板,可減少細胞黏附造成的應激。
3.NK培養基的功能
1.維持存活:提供必要的營養物質,防止NK細胞凋亡。
2.促進增殖:細胞因子(如IL2)刺激NK細胞分裂。
3.增強細胞毒活性:支持NK細胞對腫瘤或病毒感染細胞的殺傷能力。
4.支持功能研究:可用于體外實驗研究NK細胞的功能、信號通路或藥物篩選。
4.應用
1.基礎研究:
NK細胞的分子機制研究。
NK細胞發育與活化機制探索。
2.免疫治療:
體外擴增NK細胞用于過繼性細胞免疫治療。
藥物篩選與NK細胞功能評價。
3.病毒與腫瘤研究:
NK細胞與病毒感染、腫瘤細胞的相互作用實驗。
4.聯合培養:
與樹突狀細胞、腫瘤細胞或其他免疫細胞共培養,模擬免疫微環境。
5.注意事項
1.無菌操作:NK細胞對污染非常敏感。
2.細胞密度控制:過高或過低的細胞密度都會影響NK細胞增殖和功能。
3.細胞因子補充:IL2等細胞因子需要定期補充,保證NK細胞活性。
4.血清批次:不同批次血清可能對NK細胞增殖和功能有顯著影響,建議使用同批次血清進行實驗。
NK培養基是一種為體外NK細胞生長、增殖和激活優化的特殊培養基。其核心是提供適宜的營養環境和細胞因子(尤其是IL2),以維持NK細胞功能并支持相關免疫學研究和治療應用。